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如今做方陣，做ELISA試劑盒已是輕車熟路了，曾經(jīng)檢查一種抗體用整整一下戰(zhàn)書還算得暈暈的，如今給我十個(gè)八個(gè)的從包被到顯色，一個(gè)工作日根本搞定。但是在新老手操作過程中老是會(huì)泛起或大或小的標(biāo)題，本人在剛開始做ELISA試劑盒時(shí)就面臨良多災(zāi)題，固然有師兄師姐鋪路，但仍是常常做得烏煙瘴氣，比如說花板，假陽性，全顯色，全部顯色，顯色比空缺還低。大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)一般富含更多的疏水基團(tuán)，故更易吸附到固相載體表面。
ELISA試劑盒小分子必需依賴和大的蛋白載體偶聯(lián)后才能固定在固相載體上。還有有的包被原也許不是蛋白，對(duì)于生物素和脂類物質(zhì)或小分子物質(zhì)咱們要事前對(duì)其改造再加以包被，ELISA試劑盒親和素生物素:先親和素先包被載體，參加生物素化的DNA，這種包被辦法平均、牢固，已擴(kuò)展應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測(cè)定。常用的包被液除了方才提到的pH9.6碳酸鹽緩沖液，還有pH7.2的磷酸鹽緩沖液和pH7-8的Tris-HCL緩沖液等等。
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中，查驗(yàn)同一樣本達(dá)20次以上時(shí)，就會(huì)發(fā)現(xiàn)這組數(shù)據(jù)（指測(cè)定成果的吸光值）散布在均值兩邊，大多數(shù)會(huì)集在均值附近。假如以測(cè)定值為橫坐標(biāo)，以呈現(xiàn)的頻率為縱坐標(biāo)作圖，就可繪出一個(gè)呈鐘形的曲線圖。鐘頂處為均值，別的值以均值為中心對(duì)稱散布，這即是正態(tài)散布。